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科立得利用專利技術固定底物技術酶底物法（DST），同時檢測總大腸菌群和大腸埃希氏菌。科立得采用ONPG 和 MUG 這兩種營養指標劑。這兩種指示劑分別會被大腸菌群酶——β-半乳糖苷酶和大腸埃希氏菌酶——β-葡萄糖醛酸苷酶代謝。

當總大腸菌群在科立得中生長時，可利用 β-半乳糖苷酶代謝 ONPG，使樣品從無色變成黃色。 

大腸埃希氏菌利用 β-葡萄糖醛酸苷酶分解 MUG，產物有熒光。由于大多數非大腸菌群沒有這些酶，他們就無法生長，也就不能干擾實驗結果。僅有的幾種含有這些酶的非大腸菌群的生長，也被科立得檢測專有的配方基質有選擇性地抑制住了。

這種方法與傳統的培養基法不同。傳統的培養基法為目標生物體和非目標生物體都提供了一個營養豐富的環境，促進他們的生長。當非目標生物體繁殖，模仿目標生物體時，也就有了假陽性的出現。在傳統培養基中，非目標生物體的生長還可抑制目標生物體的生長，導致假陰性結果。為了抑制非目標生物，傳統培養基中常有高含量的鹽、洗滌劑或其他選擇性試劑，這在不經意間抑制了目標生物體的生長，進一步導致假陰性結果。

只有 IDEXX 試劑經驗證并獲得批準，可與 Quanti-Tray 51孔定量盤 和 Quanti-Tray/2000 97孔定量盤 配套使用。

第 1 步

將試劑加到樣品中。

第 2 步

將其倒入 Quanti-Tray 51孔定量盤（計數范圍 1～200）或 Quanti-Tray/2000 97孔定量盤（計數范圍 1～2419）。

第 3 步

使用 Sealer Plus 程控定量封口機封口后，放入恒溫箱，在 36°C ± 1°C 下培養 24 小時（其他國家的法規對溫度的要求可能有所不同）。

第 4 步： 51孔定量盤法

Quanti-Tray 51孔定量盤——讀取結果：

• 黃色孔 = 總大腸菌群

• 黃色且顯熒光孔 = 大腸埃希氏菌

• 記下有陽性反應的孔數，并查閱 MPN 表

第 4 步： 97孔定量盤法

Quanti-Tray/2000 97孔定量盤——讀取結果：

• 黃色孔 = 總大腸菌群

• 黃色且顯熒光孔 = 大腸埃希氏菌

• 記下有陽性反應的孔數，并查閱 MPN 表